PNAS | 1+1>2! 我國學者研發新型疫苗，強強聯合，效果翻倍！

近年來，病毒載體疫苗與納米顆粒疫苗因其獨特優勢成為疫苗研發領域的研究熱點，但單一技術平臺仍存在各自瓶頸，病毒載體疫苗雖能高效遞送抗原并激活免疫，卻在抗原呈遞效率和黏膜免疫誘導上有所欠缺；納米顆粒疫苗雖能實現抗原多價展示并增強免疫應答，卻面臨遞送效率低、規模化生產困難等問題。

2026年4月29日，華中農業大學趙凌獨立通訊在PNAS在線發表了題為“An Ad5-vectored platform generating self-assembling VLPs elicits potent mucosal immunity against influenza A virus and SARS-CoV-2”的研究論文。創新性地將腺病毒載體（Ad5）與病毒樣顆粒（VLPs，一種納米顆粒疫苗形式）的優勢相結合，構建了Ad5-Envp-VLP新型疫苗平臺，通過體內原位組裝VLPs，實現了抗原高效遞送與強效免疫應答的雙重突破，為新型廣譜疫苗研發提供了全新思路與技術支撐。

該研究的核心創新點的是利用EABR策略，將病毒包膜蛋白如流感HA蛋白、SARS-CoV-2 S蛋白、狂犬病RVG蛋白與EABR基序融合，構建重組腺病毒載體Ad5-Envp-VLP。與傳統腺病毒疫苗Ad5-Envp不同，該載體感染細胞后，可驅動包膜蛋白自發組裝形成VLPs并分泌至細胞外，實現了“病毒載體遞送+納米顆粒原位組裝”的協同作用：腺病毒載體負責將抗原基因高效遞送至宿主細胞，確保抗原持續表達；VLPs則通過多價抗原展示，模擬天然病毒的空間結構，增強抗原識別與免疫激活效率，同時規避了傳統VLPs體外組裝復雜、成本高昂的弊端。

研究團隊以流感病毒IAV為模型，系統驗證了Ad5-HA-VLP疫苗的免疫原性與保護效力。結果顯示，與傳統Ad5-HA疫苗相比，Ad5-HA-VLP免疫后，小鼠體內早期體液免疫應答顯著加速：免疫后4天即可檢測到血凝抑制HI抗體，HA特異性IgM滴度提升3.95倍；免疫后7天和14天，HI抗體與IgG抗體滴度均顯著高于對照組，且在174天的長期監測中維持較高水平。

機制研究表明，VLPs可通過增強B細胞早期激活，促進生發中心GC形成和維持，以及誘導短壽命漿細胞SLPC快速分化來加速抗體產生；同時，轉錄組分析顯示，VLPs可驅動B細胞轉錄重編程，上調細胞周期調控基因Cdc6、Cdc45等與體細胞超突變關鍵基因Aicda，促進B細胞增殖與抗體多樣化，為長效免疫提供分子基礎。

在T細胞免疫應答方面，Ad5-HA-VLP展現出更強的激活能力與記憶分化潛力。該疫苗可顯著提升CD4+和CD8+ T細胞中CD69+激活亞群比例，促進效應記憶T細胞TEM與中央記憶T細胞TCM分化，尤其是誘導多功能CD8+ T細胞擴增，其數量是傳統疫苗組的3.28倍。值得注意的是，該疫苗在長期免疫監測中未誘導T細胞耗竭，反而通過調控T細胞亞群極化，增強免疫記憶的持久性，為二次免疫應答提供保障。

黏膜免疫是抵御呼吸道病原體的第一道防線，因此該研究重點驗證了Ad5-Envp-VLP經鼻內遞送的黏膜免疫誘導能力。結果顯示，鼻內免疫后，疫苗可在肺部實現短暫而高效的抗原表達，HA蛋白在支氣管肺泡灌洗液中的濃度較傳統疫苗提升36倍；同時，顯著誘導肺部黏膜IgA抗體產生，提升HA特異性IgA分泌細胞數量，并促進CD8+組織駐留記憶T細胞分化。進一步通過單細胞RNA測序分析發現，VLPs可重塑肺部免疫微環境，促進樹突狀細胞、肺泡巨噬細胞等固有免疫細胞的招募、激活與成熟，上調抗原加工呈遞相關基因與炎癥因子表達，構建有利于適應性免疫啟動的微環境，實現固有免疫與適應性免疫的協同激活。

為驗證疫苗的實際保護效果，研究團隊進行了致死性流感病毒攻擊實驗。結果顯示，Ad5-HA-VLP鼻內免疫可實現100%的同源保護率，且體重損失顯著低于傳統疫苗組；更重要的是，該疫苗可提供異源保護，對H1N1、H3N2等不同亞型流感病毒的保護率分別達到80%和100%，而傳統腺病毒疫苗保護效果有限。病理分析表明，疫苗免疫可顯著減輕肺部炎癥損傷，維持正常肺組織結構，降低肺部病毒載量，進一步證實了其強效保護潛力。

該技術的通用性與擴展性是其另一大亮點。研究團隊將該技術拓展至SARS-CoV-2與狂犬病疫苗研發，構建了Ad5-S-VLP與Ad5-RVDG-VLP疫苗。結果顯示，Ad5-S-VLP可誘導高水平中和抗體與黏膜IgA，對SARS-CoV-2 JN.1及WA1/D614G、BA.2.86等變異株均具有廣譜中和活性；Ad5-RVDG-VLP在小鼠、犬、貓等多種物種中均能快速誘導保護性中和抗體，免疫后7天即可實現100%血清陽轉，且保護效價維持1年以上，展現出良好的跨物種適用性。此外，研究團隊還構建了雙價疫苗Ad5-S-HA-VLP，可同時誘導針對SARS-CoV-2與流感病毒的特異性免疫應答，為多病原體聯合防控提供了可行方案。

簡而言之，該研究通過病毒載體與納米顆粒疫苗的優勢融合，構建了新型Ad5-Envp-VLP疫苗平臺，系統闡明了其通過原位VLPs組裝、免疫細胞轉錄重編程、固有-適應性免疫協同激活實現強效免疫保護的分子機制，并在多病原體、多物種中驗證了其有效性與通用性。

參考鏈接：https://doi.org/10.1073/pnas.2519857123

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